产品及特点

尊龙凯时推出的本检测试剂盒是基于探针法荧光定量PCR原理而开发，具有以下显著特点：

即开即用

用户仅需提供样品DNA模板，无需繁琐的准备过程。

高灵敏度

经过优化的引物等组分，确保高灵敏度的检测效果。

阳性对照

提供阳性对照，帮助用户有效区分假阴性样品，确保实验结果的可靠性。

高特异性

引物设计基于中间普雷沃菌DNA序列的高度保守区，确保不会与其他生物样本的DNA发生交叉反应。

多功能检测

该产品同时支持定性和定量检测，定量检测时的线性范围至少为五个数量级。

充足的实验次数

本产品可供50次20μL体系的探针法荧光定量PCR反应使用。

科研专用

请注意，本产品仅限于科研使用。

实验步骤概述

一、DNA提取

使用自选方法提取和纯化样品DNA，尊龙凯时的试剂盒与大多数市场上的核酸提取试剂盒兼容。

二、稀释标准曲线样品

为了避免样品污染，稀释操作应在独立区域进行：

1. 标记六个离心管，分别为7、6、5、4、3、2。
2. 使用带芯枪头加入45μL DEPC-H2O。
3. 在7号管中加入5μL 1×10E8拷贝/μL的阳性对照，混匀得1×10E7拷贝/μL的标准品。
4. 以此类推，稀释至6个不同浓度的标准曲线样品。
5. 如无需制作标准曲线，可直接将阳性对照稀释至1×10E5拷贝/μL。

三、试剂配制

准备N+2个qPCR管，将待检样品、阴性对照和阳性对照所需成分按照详细说明书准备好，并转移至样本准备区。

四、添加模板

向各qPCR管中加入2μL模板，依次添加阴性对照、待测样品和阳性对照，随后离心30秒，立即进行扩增反应。

五、扩增反应

将PCR管置于PCR扩增仪器中，根据详细说明书进行扩增。

六、结果分析

依据阳性对照的Ct值绘制标准曲线，或根据Ct值判断阳性与阴性结果。如果需复检，Ct值在35-38范围内的样本需要特别注意。

运输及保存

建议低温运输，并在-20℃条件下保存，保质期为一年。阳性对照需单独保存，避免污染其他试剂。