在2019年11月，加利福尼亚大学旧金山分校的研究团队在《Nature Medicine》杂志上发表了一项关于肠道病毒感染引发儿童急性无力脊髓炎（AFM）的研究。该研究采用了PhIP-seq技术和病毒组抗原库，对42名确诊AFM的儿童及58名其他神经系统疾病儿童的脑脊液样本进行了检测，筛选出与AFM相关的病毒特异性抗体。

研究结果显示，AFM患者的组中肠道病毒抗体显著富集，并通过ELISA方法进行了验证。这一发现提示肠道病毒感染可能是大多数AFM病例的病因，为快速开发肠道病毒脑脊液抗体检测方法指明了方向，有助于今后的临床诊断。

研究背景

急性无力脊髓炎（AFM）自2012年在美国首次被识别以来，已有超过500名儿童受到影响。该病通常在两年一次的爆发期中，与EV-D68型和EV-A71型肠道病毒的传播有关。然而，AFM的具体病因一直不明，因在少于50%的患者样本中只能检测到肠道病毒。此外，约2%的AFM儿童的脑脊液中能找到肠道病毒的核酸。因此，研究人员对此现象表示担忧，认为AFM可能由未知病原体或副感染性免疫反应引起。

研究方法

为了进一步明确AFM的发病机制，研究小组运用了PhIP-seq技术，解析AFM患者及对照样本脑脊液中的病毒抗体谱。PhIP-seq能够高通量地一次性检测数百种病毒的特异性抗体，并通过ELISA实验验证结果。

主要研究发现

1. **病毒抗体响应**: PhIP-seq技术分析显示，AFM患者特有的病毒抗体中，小RNA病毒家族中的肠道病毒抗体响应显著高于对照组样本。

2. **免疫原性抗原肽段**: 数据分析揭示，免疫原性的抗原肽段来源于肠道病毒整条基因组的蛋白质，且PhIP-seq技术不仅能够识别已知的线性表位序列，还可发现新的线性结合表位。

3. **ELISA验证**: 使用EV病毒VP1蛋白进行ELISA实验，结果与对照组（7/50）相比，在AFM患者组的绝大多数脑脊液样本中（22/26）均检测到EV信号，结果与PhIP-seq数据一致性较好。

研究结论

PhIP-seq（噬菌体免疫沉淀测序）技术是一种高通量抗体谱检测手段，结合了高容量噬菌体展示多肽库、抗体免疫沉淀与高通量测序。这项技术能够针对数十万种抗原进行高效的血清抗体检测，为免疫力研究提供了强大的工具。

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